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测定检查绿壳蛋鸡苗的适应环境。

2019/5/23 11:46:34      点击:
   测定法中应用最广泛的一种测定方法,以物理吸附法制备免疫吸附剂。现介绍猪病诊断中常用的两种方法间接法和夹心法。①问接法将已知抗原吸附(或称包被)于固相载体,孵育后洗去未吸附的抗原,随后加人含有特异性抗体的被检血清,感作后洗涤未起反应的物质,加人酶标抗同种球蛋白(如被检血清是猪血清,则需用抗猪球蛋白),感作后再经洗涤,加人酶底物底物被分解后出现颜色变化,颜色变化的速度及程度,与样品中的抗体量有关,即样品中的抗体愈多,颜色出现愈快、愈深。测定检查绿壳蛋鸡苗的适应环境。
     材料:0.05摩/升、pH值9.6碳酸盐缓冲液,稀释液用0.01摩/升、pH值7.2磷酸盐缓冲盐水(含0.13摩/升氯化钠,5%犊牛血清),洗涤液用0.01摩/升、pH值7.2磷酸盐缓冲盐水(含0.13摩/升氯化钠,0.05%吐温20),30%过氧化氢,邻苯二胺(OPD),pH值5磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液,2摩/升硫酸,抗原,阳性血清,阴性血清,待检血清,酶标兔抗猪免疫球蛋白G,40孔聚苯乙烯酶联板,酶联免疫检测仪。操作:
  第一,用碳酸盐缓冲液配制一定浓度的抗原包被液包被酶联板,每孔100微升,置37C条件下2小时,或在4°C冰箱内过夜。
  第二,倾去孔内液体,用洗涤液加满各孔,洗涤3次,每次3分钟,然后倾尽洗涤液。
  第三,除调零孔外,其余孔加人用稀释液稀释的待检血清,每孔100微升,同时设立阳性、阴性血清对照,置37"C下反应1.5小时。
  第四,抗体效价测定:将待检血清进行倍比稀释。